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O Instituto Colombiano para a Promoção das Artes e Ciências em Washington, D.C. foi quem primeiro sugeriu a criação de um jardim botânico em Washington em 1816. Em 1820 o Congresso doou um terreno próximo ao Capitólio. Em 1838, Charles Wilkes embarcou na United States Exploring Expedition a mando do Congresso no Oceano Pacífico e durante a expedição, Wilkes coletou várias espécies de plantas das ilhas que visitou. Wilkes retornou aos Estados Unidos em 1842 com uma coleção gigantesca de plantas que foram depositadas no recém construído Jardim Botâncico. O prédio foi fechado para renovações em 1 de setembro de 1997, e reaberto ao público em 11 de dezembro de 2001.
